近日2025年的M100文件更新，检验领域专家张利军、李艳、宁永忠对内容变更进行了梳理分析和翻译、介绍。（版权归CLSI所有。内容以原文为准，译文和解释仅供参考。）

▼ Overview of Changes（变更概述）

CLSI M100-Ed35 replaces CLSI M100-Ed34, published in 2024. Major additions, reformatting, and/or table relocation changes are summarized below, followed by additional noteworthy changes detailed by section/table. Changes to content since the previous edition appear in boldface type; however, minor editorial or formatting changes are not listed here, nor highlighted in boldface type. To learn more about the organization of CLSI M100-Ed35, check the “Instructions for Use.”

CLSI M100-Ed35取代了2024年发布的CLSI M100-ed34。下面总结了主要的添加、重新格式化和/或表重新定位更改，然后是按章节/表详细列出的其他值得注意的更改。自上一版以来对内容的更改以黑体显示；但是，这里没有列出微小的编辑或格式更改，也没有以粗体突出显示。要了解有关CLSI M100-Ed35组织的更多信息，请查看“使用说明”

CLSI M100 is updated and reviewed annually as new data and new agents become available. Use of outdated documents is strongly discouraged.

CLSI M100每年都会随着新数据和新试剂的出现而更新和审查。强烈建议不要使用过时的文件。

▼ Major Additions and/or Revisions（主要增补和/或修订）

● Throughout: Changed categorization of disk diffusion from a “reference” method to a “standard” method; the disk diffusion method described in CLSI M02 is no longer considered a reference method but remains a standard method.

● 全文：将纸片扩散法的分类，从“参考”方法改为“标准”方法；CLSI M02中描述的纸片扩散方法，不再视为参考方法，而是如上为标准方法。

● Throughout: Modified QC testing frequency recommendations from “daily or weekly” to “daily or per IQCP.”

● 全文：将质量控制频率建议，从“每日或每周”修改为“每日或按IQCP”。

宁按：IQCP的全称，出现在p16（就是从封面算起，第50页纸）。这应该算是行文和排版的瑕疵。即：individualized quality control plan，个体化的质控计划。换句话说，IQCP就是自己实验室规定。当然，我理解，不能规定的比一周长。

● Tables 1: Removed all footnotes related to testing tetracycline and extrapolating results for doxycycline and/or minocycline (Tables 1A-1, 1A-2, 1B-2, 1B-5, 1C, 1D, 1E, 1G, and 1H-1); these comments are retained in the respective Tables 2 where relevant.

● 表1：删除了与四环素检测和多西环素和/或米诺环素外推结果相关的所有脚注（表1A-1、1A-2、1B-2、1B-5、1C、1D、1E、1G和1H-1）；这些评论保留在相应的表2中（如相关）。宁按：表1是药物按tier的列表，表2是折点。

● Tables 2: Changed title of “Routine QC Recommendations” box to “QC Recommendations” and removed listings of specific QC strains from the boxes; recommendations for QC strain testing and frequency are now in Appendix I.

● 表2：将“常规质控建议”框的标题改为“质控建议”，并从框中删除了特定质控菌株的列表；QC菌株检测和频率的建议见附件I。

● Tables 1 and 2: Removed fluoroquinolones from the “Warning” box that lists agents that should not be reported on CSF isolates.

● 表1和表2：从“警告”框中删除氟喹诺酮类，该框列出了不应在CSF分离株报告的药物。宁按：如下表。

上面是对表2A-2J的说明。脑脊液种细菌分离株，不能做药敏试验的药物包括：仅能口服的一二代头孢菌素和头霉素、多利培南、厄他培南、亚胺培南、克林霉素、lefamulin、大环内酯类和四环素类。

用的是“warning”，即警告。

宁按：上面非口服的药物，指通过静脉给药的情况。

宁按：我们知道，氟喹诺酮类是可以用于脑膜炎感染的。《治疗指南：抗生素分册》第15版（盛瑞媛等翻译，化工出版社，2022年）中译本p235经验治疗儿童有环丙沙星、莫西沙星，脑膜炎奈瑟菌儿童有环丙沙星，p237流感嗜血杆菌儿童有环丙沙星——当然都不是一线，都是在其他药物过敏等特殊情况下候选。文献有新生儿人型支原体脑膜炎用左氧氟沙星成功治疗的案例（Pediatr Int. 2024 Jan-Dec;66(1):e15814.），有新生儿疑似脑膜炎时，环丙沙星脑脊液群体药代动力学研究（Pediatr Res. 2024 Apr;95(5):1273-1278.）。也有环丙沙星预防脑膜炎奈瑟菌导致的脑膜炎的研究（PLoS Med. 2018 Jun 26;15(6):e1002593.）。结核性脑膜炎的研究和应用文献更多（Clin Infect Dis. 2022 Oct 29;75(9):1594-1601.）。

对国内实际应用，吴老师指导：有没有效的问题，毕竟氟喹诺酮类脂溶性较强，在中枢有一定的浓度。但是中枢感染用药时间长，氟喹诺酮类用久了容易耐药。另外，部分中枢感染的病原菌（如MRSA或者部分耐药的阴性菌），有时候氟喹诺酮类也覆盖不了。而且，细菌性脑膜炎容易出现抽搐等症状，而氟喹诺酮类容易导致谵妄等中枢不良反应，所以常常不推荐使用。

● Tables 2: Modified comments related to testing tetracycline and extrapolating results for doxycycline and/or minocycline, as appropriate for organisms or organism groups where tetracycline, doxycycline, and/or minocycline breakpoints are listed.

● 表2：对与四环素检测和多西环素和/或米诺环素外推结果相关的评价，进行了修改，以适用于列出四环素、多西环素和/或米诺环素折点的细菌或菌群。宁按：如下表肠杆菌目折点。

上面黑体字是：

(33) Isolates that test susceptible to tetracycline are considered susceptible to doxycycline and minocycline. Isolates that test intermediate or resistant to tetracycline should be tested against doxycycline or minocycline if those results are needed for treatment.

即：对四环素敏感的分离株，可以认为对强力霉素和米诺环素敏感。如果治疗需要强力霉素或米诺环素的结果，则应对四环素中介或耐药的分离株进行检测。

● Table 2A-1, Table 3B, and Table 3C: Enhanced recommendations for the performance of carbapenemase testing, including the identification of the carbapenemase type, for carbapenem-resistant Enterobacterales to support treatment decisions and infection control practices.

● 表2A-1、表3B和表3C：加强碳青霉烯酶检测性能的建议，包括碳青霉烯酶类型的鉴定，以支持碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌的治疗决策和感染控制实践。宁按：如下表肠杆菌目折点。

上面黑体字翻译如下：

Isolates resistant to any carbapenem tested (eg, ertapenem, imipenem, meropenem) should be tested for a carbapenemase using phenotypic and/or molecular assays. An exception to this recommendation is Proteus, Providencia, and Morganella spp. that are only resistant to imipenem. These assays should identify and ideally differentiate the presence of specific carbapenemase types (eg, KPC, NDM, OXA-48, VIM, IMP). 

应使用表型和/或分子方法检测对任何碳青霉烯类药物（如厄他培南、亚胺培南、美罗培南）有耐药性的分离株的碳青霉烯酶。这一建议的一个例外，是仅对亚胺培南有耐药性的变形杆菌属、普罗维登属和摩根菌属。这些检测应能识别并可以理想地区分特定碳青霉烯酶类型（如KPC、NDM、OXA-48、VIM、IMP）的存在。

Decisions related to carbapenemase testing and reporting are best made by each laboratory in consultation with the antimicrobial stewardship team and other relevant institutional stakeholders. 

与碳青霉烯酶检测和报告相关的决定，最好由每个实验室与抗菌药物管理团队和其他相关机构利益相关者协商后做出。

These results do not replace antimicrobial susceptibility testing, but are important for treatment decisions, and to inform infection control and prevention interventions and/or epidemiologic investigations. 

这些结果并不能取代抗菌药物敏感性试验，但对治疗决策很重要，并为感染控制和预防干预措施和/或流行病学调查提供信息。

Depending on local epidemiology and available resources, carbapenemase testing for E. cloacae complex and K. aerogenes isolates that are only resistant to ertapenem might not be necessary. Ertapenem resistance in these species is often due to mechanisms other than carbapenemase production and carbapenemases are currently uncommon in such isolates.

根据当地流行病学和可用资源，可能不需要对仅对厄他培南耐药的阴沟肠杆菌复合群和产气克雷伯菌分离株进行碳青霉烯酶检测。这些种对厄他培南的耐药性通常不由碳青霉烯酶导致，而是其他机制造成的——碳青霉烯酶类目前在这些分离株中并不常见。

张按：具体到碳青霉烯酶检测的推荐，可以对比EUCAST V15.0文件

虽然EUCAST 肠杆菌目的碳青霉烯类药物的折点标准较CLSI M100更“宽松”，但碳青霉烯酶的检测结果同样不会影响碳青霉烯类药物的药敏结果分类。而如果要做碳青霉烯酶筛查，只要美罗培南的MIC＞0.125ug/ml或者抑菌圈直径＜28mm即可，不像M100中只在碳青霉烯类药物耐药时才推荐筛查碳青霉烯酶。

● Table 2B-3 and Appendix F: Removed MIC breakpoints which are no longer considered reliable for Burkholderia cepacia complex. Added instructions for handling B. cepacia complex should AST be requested. Developed ECVs for B. cepacia complex and added these to Appendix F.

● 表2B-3和附件F：删除了不再认为对洋葱伯克霍尔德菌复合群可靠的MIC折点。如果需要AST，添加了处理该复合群的说明。为该复合群设计了ECV，并将其添加到附件F中。宁按：如下表洋葱伯克霍尔德菌复合群的流行病学折点。

上面是整体，下面是局部，便于微信阅读。

宁按：前面表2B-3，已经没有折点了。

张按：上述的ECV与M100 Ed34中的MIC折点也有区别，同时，与EUCAST的ECV值也有不同，可见在洋葱伯克霍尔德菌复合群的ECV研究中还有更多的待确定的内容。下图是EUCAST的截图。

上面图肯定看不清。大家看一下原文吧。

● Appendix H: Expanded to include testing instructions when an MIC method for any agent is modified beyond the standard CLSI MIC reference method. Added method for testing exebacase (Appendix H2) that includes the instructions for testing exebacase previously located in Tables 5A-1 and 6A.

● 附件H：扩展到如下检测，即当任何试剂的MIC方法修改为超出标准CLSI MIC参考方法时的情况。增加了检测细胞壁水解酶（exebacase）的方法（附件H2），其中包括之前位于表5A-1和6A中的检测细胞壁水解酶（exebacase）的说明。

宁按：看上面截图，附件H仅针对头孢地尔和细胞壁水解酶（exebacase）。下面截图是细胞壁水解酶。这两个截图在微信里可能不太清晰，大家看一下原文。

● Appendix I: Added new appendix with suggestions for development of a QC plan that includes selection of QC strains and QC testing frequency.

● 附件I：增加了新的附件，其中包含制定质量控制计划的建议，包括选择质量控制菌株和质量控制检测频率。

宁按：看上面截图附件I的第一页。这个内容很多，从p368-p377。小标题是I1-I8。分别是：

● I1 Regulatory Requirements for Selection of Quality Control Strains and Quality Control Testing Frequency：质量控制菌株选择和质量控制频率的监管要求；

● I2 Development of an Individualized Quality Control Plan：制定个体化质量控制计划；

● I3 Resources for Development of an Individualized Quality Control Plan for Antimicrobial Susceptibility Testing：用于制定抗菌药物敏感性试验的个体化质量控制计划的资源；

● I4 Type of Quality Control Errors：质量控制错误类型；

● I5 Selection of Quality Control Strains to Quality Control Antimicrobial Agents and Specific Media Components：用于质量控制抗菌药物和特定培养基的质量控制菌株的选择；

● I6 Quality Control Plans：质量控制计划；

● I7 Indicators to Detect Antimicrobial Susceptibility Testing System Problems：检测抗菌药物敏感性试验系统问题的指标；

● I8 Example Quality Control Plans: User’s Laboratory：质量控制计划示例：用户实验室；

可见内容细致全面。对于个体化质控方案的设计、实施、分析等，大有裨益。综上，今年M100文件较大变化是氟喹诺酮类不再出现在脑脊液分离株药敏试验禁忌中，洋葱伯克霍尔德菌复合群改为流行病学折点，以及个体化质控计划等。具体信息，请看原文。欢迎反馈！

相关问答

提问1：折点有无更新？

回答：洋葱伯克霍尔德菌复合群改为流行病学折点；

上面截图显示，不动杆菌属，氨苄西林舒巴坦的纸片扩散法折点调整；米诺环素纸片扩散法和MIC折点调整；删去多西环素和四环素折点。宁按：多西环素竟然删去了。

张按：不动杆菌属的治疗中氨苄西林舒巴坦是非常重要的药物，本次只改变了其KB的折点，旧版≥15mm即为敏感，而新版≤16即为耐药，需≥22mm才算敏感。如果实验室以KB法作为常规报告方式，可能需要与临床进行沟通。IDSA等治疗指南中认为即使药敏结果耐药，对于CRAB的治疗，也是推荐以舒巴坦制剂为基础进行联合治疗。

米诺环素在治疗CRAB中，也是IDSA推荐的联合用药的备选药物之一，甚至米诺环素还优于替加环素。这次调整，大幅降低了米诺环素的折点标准，并且在KB法中介时且临床打算使用米诺环素治疗时推荐用MIC法来进行确认，避免出现假中介。

以下是IDSA 2024版对MDRGNB治疗推荐中的内容：

在EUCAST V15.0折点中，米诺环素仍旧没有列出折点标准。

上面截图显示，脑膜炎奈瑟菌磺胺异噁唑MIC折点删去。

提问2：有无新增药物？

回答：没有。

提问3：检测方法有无变更？

回答：没有。

涉及方法的调整，如下：

具体见前面“表2A-1、表3B和表3C：加强碳青霉烯酶检测性能的建议”部分

具体如下，肉汤稀释法仅适用于两个菌种：脆弱拟杆菌，多形拟杆菌(Bacteroides thetaiotaomicron)

提问4：血培养分离株直接药敏试验有无建议？

回答：对应表格3F1-4。折点有几处增加，有一处调整

● 肠杆菌目，增加头孢吡肟，8-10hr，16-18hr

● 铜绿，增加头孢他啶，8-10hr

● 鲍曼，增加氨苄西林舒巴坦和头孢他啶，8-10hr；哌拉西林他唑巴坦，8-10hr，16-18hr

● 鲍曼，调整氨苄西林舒巴坦16-18hr

提问5：质量控制有无调整？

回答：除了上面个体化质控之外

上面截图可见，非苛养菌，米诺环素对大肠埃希菌25922的质控范围调整。另外增加了头孢布坦阿维巴坦的质控范围。

提问6：介绍一下M100推导规则、等效药物

回答：

上面是替代药物和等效药物，这一版和上一版一致。这两个截图在微信里可能不太清晰，大家看一下原文，或上一版。

提问7：介绍一下折点和ECV

回答：这要复杂一些。下面简述，如果想深入讨论，可以群里或私下随时交流。最好是看一下专门阐述这一点的文件或书籍。

ECV：

● 是流行病学界值。可以区分野生株和非野生株。定义和含义比较明确。

● 建立：自然菌株数量对MIC作图，看单峰还是双峰。剔除有获得性耐药的菌株后，确定ECV。注意，有部分菌种药物组合，不能准确确定。

● 严格来讲，ECV不能用于临床预报结果，但可以用来判断是否出现了（可能的）耐药。

● 临床上如果有别的药物显示敏感，则一般不考虑只有ECV的药物。如果没有别的药物，而MIC又低于ECV，可以审慎考虑应用。当然也要符合其他要求，如指南地位、患者个体化等。

折点：

● 是用来区分敏感、中介/剂量依赖性敏感、耐药的MIC值或纸片扩散法直径。

● 是ECV、PKPD折点、临床折点三者的综合。

● 临床折点好理解一些。是治疗有效群体和治疗归因无效群体MIC的相交区域的具体选择。

● PKPD折点，则复杂一些。首先是动物试验，血药浓度、时间点，完成作图，绘制PK曲线。药物则分时间依赖、浓度依赖、有后效应的时间依赖等几种情况。分别设定指数、目标值后，看效果。通过蒙特卡洛模拟，如果在某一MIC时，达标概率可以达到90%，则这个MIC为PKPD折点。

● 逻辑上，应该是先确定ECV，再确定PKPD折点，最后基于二者设定临时折点进行临床试验，最终确定临床折点。再参考前二者，综合确定实用折点。而实际上，因为受制于各方面要素，这个顺序也不尽然。这一版M100文件洋葱伯克霍尔德菌从临床折点回到ECV，说明了这项工作的复杂性。

张按：个人觉得非肠杆菌目的折点后续也可能会有改变或优化，因为菌种范围太广了。

作者简介

张利军

医学博士，副主任技师。重庆医科大学附属第二医院检验科微生物组副组长。重庆市细菌耐药监测网青年委员会副主任委员，中国医疗保健国际交流促进会临床微生物学分会委员。主持国家自然科学基金青年基金1项，参与多项国家级与省部级科研课题，发表论著数篇。擅长感染性疾病的病原微生物学诊断、耐药、防控等。

李艳

临汾市第二人民医院检验科，副主任技师。从事临床微生物检验工作10余年，先后于全国细菌耐药监测网实践培训基地北京协和医院、北京大学人民医院培训学习。参编北京大学医学出版社出版的《微生物学检验》教材。

宁永忠

医学硕士、主任技师、从事临床细菌学、真菌学工作19年，目前就职于清华大学附属垂杨柳医院。有社会任职，如中国医疗保健国际交流促进会临床微生物学分会（CPAM-CMI）常委、中华医学会检验分会学组委员、中华医学会微免分会学组委员等；主编书籍，如《感染性疾病的理念》（2022年第二版）、《微生物学临床一线难题释疑》（2022年出版）、《感染性疾病的微生物学》；参编参译书籍，如人卫《临床微生物学检验》，美国《临床微生物学手册》第11版和12版；有SCI论文和核心期刊；参与撰写国内专家共识和行标；致力于临床微生物学和感染性疾病学知识的普及。

作者：张利军（重庆医科大学附属第二医院）、李艳（临汾市第二人民医院）、宁永忠（北京市垂杨柳医院）；审校：鲁炳怀（中日友好医院）、吴惠妃（中山市中医院）

本文转载自订阅号「京港感染论坛」（ID：PIDMIC）

原链接戳：【规范与指南】新版M100文件（CLSI M100 35th ed）和乙巳新年一起莅临（修订版）

* 文章仅供医疗卫生相关从业者阅读参考

本文完

责编：Jerry