在临床工作中常常会遇到以下场景：

患者存在一些提示结核病的临床特征（如午后低热、肺部结节等），但无咳嗽咳痰，反复浓盐水雾化诱导后也无痰液排出，并且可能由于各种原因不适合进行支气管镜等有创操作来获取病原学或者病理学标本。

此时，我们经常会选择一些免疫学检查如γ-干扰素释放试验（IGRA）、结核菌素（PPD）试验等来协助诊断。PPD试验作为诊断结核感染的传统方法在临床应用的时间较长，大家往往比较熟悉。而IGRA作为一种较新的检测手段，在临床上的普及程度相对较低。

那么IGRA的原理和方法是什么，优点和局限性在哪里，临床意义又如何？下面为大家分享2014年中华医学会结核病学分会制定的「γ-干扰素释放试验在中国应用的建议」。

原理

受到结核菌（MTB）抗原刺激致敏的T细胞再次遇到同类抗原时可产生γ-干扰素，IGRA通过检测全血或分离自全血的单核细胞在MTB特异性抗原刺激下产生的γ-干扰素，判断受试者是否感染MTB。

方法

①全血检测：采用酶联免疫吸附试验 (ELISA) 检测全血中致敏T细胞再次受到MTB 特异性抗原刺激后释放的γ-干扰素水平。

②细胞检测（T-SPOT.TB）：采用酶联免疫斑点技术(ELISPOT) 测定在MTB特异性抗原刺激下，外周血单个核细胞中能够释放γ-干扰素的效应T细胞数量。

上述2种方法原理类似，均采用MTB的RD1区基因编码抗原多肽作为特异性抗原，主要有早期分泌抗原靶（ESAT-6）和培养滤液蛋白（CFP-10）抗原或抗原多肽。

需要说明的几点：

1） ESAT-6和CFP-10主要存在于MTB复合群，而在卡介苗和大多数非结核分枝杆菌（NTM） 中缺失，因此IGRAs的特异度较PPD试验好。

2）但ESAT-6和CFP-10也存在于少数几种NTM中，如堪萨斯分枝杆菌、海分枝杆菌、苏尔加分枝杆菌、转黄分枝杆菌和胃分枝杆菌，故IGRA阳性不能排除上述几种NTM感染可能。

3）由于ELISPOT技术是从单细胞水平进行检测，可及时捕获细胞周围分泌的细胞因子，故选择细胞检测较全血检测敏感度更高。

优势与局限

优势：包括使用主要针对结核分枝杆菌的抗原（即与卡介苗和NTM的交叉反应最小）、测试可以在单次就诊中完成、在实验室环境中检验的操作过程和结果报告都由监管机构认证（PPD试验结果需要人工测量）。

局限：包括费用较高，需要静脉采血（在小婴儿中可能相对困难）、结果阈值缺乏共识以及结果的可重复性较差等。

IGRA在我国应用的建议

1、IGRA在成人活动性结核病辅助诊断中的应用

① IGRA不能用于确诊或排除活动性结核病，但对缺少细菌学诊断依据的活动性结核病（如菌阴肺结核等），IGRA可在常规诊断依据的基础上，起到补充或辅助诊断的作用。

② 目前国家食品药品监督管理总局批准的IGRA仅限于血液样本的检测，IGRA检测胸腔积液和腹水等非血液标本的检测程序、判断标准和诊断效能有待进一步研究。

2、IGRA对儿童活动性结核病的辅助诊断

① IGRA的敏感度并不优于PPD试验，且IGRA操作复杂、价格昂贵，不建议常规以IGRA替代PPD试验对儿童活动性结核病进行辅助诊断。

② PPD 试验易受年龄和疾病严重程度的影响而出现假阴性，建议联合应用IGRA和PPD试验作为儿童结核病的辅助诊断方法，尤其适用于重症结核病和难以获得细菌学诊断依据的结核病。

3、IGRA在结核潜伏感染（LTBI）诊断中的应用

① 活动性肺结核患者密切接触者和医务工作者中LTBI的诊断：

1）PPD试验和IGRA均可用于LTBI的诊断和追踪，若考虑到PPD试验检测结果可能受卡介苗接种或NTM影响时，可对PPD试验阳性者进一步采用IGRA帮助确认；

2）不宜采用IGRA对大范围人群进行LTBI筛查；

3）PPD试验仍是健康人群动态筛查LTBI的首选。

② IGRA对儿童MTB感染的排查作用：

排查儿童MTB感染时，先采用PPD试验，对PPD试验阳性者可再行IGRA辅助确诊。

③ IGRA在HIV感染等免疫抑制或缺陷患者LTBI诊断中的应用：

1）对HIV感染人群进行LTBI 筛查，单用PPD试验的敏感度不高，应单用IGRA或联合使用PPD试验，在方法选择上优先考虑细胞检测技术；

2) 自身免疫性疾病和器官移植患者在接受糖皮质激素或 TNF-α拮抗剂治疗前，可以单用IGRA或联合使用PPD试验筛查LTBI。

总结

1、IGRA可用于诊断MTB感染，但不能区分活动性结核病和LTBI，也不能准确预测LTBI发展为活动性结核病的风险；

2、IGRA对疑似结核病患者具有辅助诊断作用，IGRA阴性结果对排除MTB感染有一定帮助；

3、IGRA用于筛查LTBI时不受卡介苗接种的影响，较少受到NTM感染的影响，但IGRA不适用于流行病学筛查，不推荐以IGRA替代PPD试验用于健康人群公共卫生干预中的筛查手段；

4、IGRA在HIV感染人群中筛查LTBI的敏感度优于PPD试验，但在其他人群中的检测效率尚需进一步研究。

参考文献 

[1] γ-干扰素释放试验在中国应用的建议[J].中华结核和呼吸杂志,2014,37(10):744-747.

[2] Lewinsohn, David M et al. “Official American Thoracic Society/Infectious Diseases Society of America/Centers for Disease Control and Prevention Clinical Practice Guidelines: Diagnosis of Tuberculosis in Adults and Children.” Clinical infectious diseases: an official publication of the Infectious Diseases Society of America vol. 64,2 (2017): 111-115. doi:10.1093/cid/ciw778

作者：周王继；审校：田欣伦

本文转载自订阅号「帅府园论坛」（ID：shuaifuyuanluntan）

原链接戳：γ-干扰素释放试验在临床中的应用

本文完

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