在新型冠状病毒肺炎的实验室检测及防护中,我们需要注意哪些问题?
来源: 京港感染论坛 2020-04-16

一、新型冠状病毒的病毒学相关内容


新型冠状病毒是RNA病毒,属于β属冠状病毒。SARS-CoV-2可通过ACE2受体感染细胞。


二、 新型冠状病毒的检测方法:


新冠肺炎确诊病例诊断标准与我们实验室的检测息息相关,疑似病例(具备COVID-19的流行病学史及临床表现)的基础上,可采集上呼吸道样本(鼻咽/口咽拭子、鼻咽冲洗或吸出物、下呼吸道样本(痰、吸出物、灌洗物)、也可考虑粪便、全血、尿液、活检组织等标本,只有满足下述病原学或血清学证据之一者才能确诊:实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性;病毒基因测序,与已知的新型冠状病毒高度同源;血清新型冠状病毒特异性IgM抗体和IgG抗体阳性;血清新型冠状病毒特异性IgG抗体由阴性转为阳性或恢复期较急性期4倍及以上升高。我们要注意,抗体检测仅作为疑似患者的补充检测,不作为新冠病毒感染者的确认和排除依据,且抗体检测不适用于一般人群的筛查。


1、 SARS-CoV-2核酸检测方法:


RT-PCR法,基因测序,数字PCR法,他们的对照比较见下表所示。核酸检测要注意假阴性问题,在被感染者中检出核酸,需同时满足以下4个条件:被感染者的细胞中有一定量的病毒;采集标本时,必须采集到含有病毒的细胞:比如取口咽拭子到咽后壁及扁桃体隐窝、反复擦拭3-5次取表面黏膜细胞;需要可靠的体外诊断试剂,以及规范的临床核酸检测实验室。



2、SARS-COV-2病原学检测方法—抗体检测


我们通常采用胶体金法、酶联免疫吸附试验、化学发光免疫试验方法,去检测IgM抗体和/或IgG抗体,IgM抗体最早出现,5天即可阳性,IgG抗体通常14天出现。有研究表明确诊病例和疑似病例IgM抗体阳性率分别为75.6%和93.1%,并不是所有新冠患者的抗体都会阳性,但IgM ELISA联合PCR检测的阳性检出率是98.6%。IgM阳性不一定是新冠患者,类风湿因子、嗜异性抗体、补体、抗鼠IgG抗体、标本溶血、贮存时间过长等都会影响IgM、IgG抗体结果,要注意复查。



3、 COVID-19可能合并其他病原体感染:


COVID-19疑似病例、确诊病例可同时进行甲型流感、乙型流感核酸检测,真菌及细菌检测,支原体、呼吸道合胞病毒等检测,CRP和PCT检测对鉴别是否合并细菌感染有一定价值,有研究表明1%患者合并细菌感染、4%患者合并真菌感染,重症患者易合并感染。



三、新型冠状病毒检测的实验室防护


1、 标本处理:疑似或确认患者标本采集需要进行三级生物安全防护;只进行必要的项目检测;标本运输时标本加盖,装入密封袋 ,密封袋再放入标本盒,标本盒置于标本转运箱。标本离心避免使用自动脱帽离心机;离心后静罢10分钟以上后取出;生物安全柜中开盖。标本培养的相关操作(液化、振荡、涂布、划线等)须在生物安全柜内完成。血培养瓶阳性瓶转种时须在安全柜内进行。培养皿接种后,密封四周并做特殊标记。要注意气溶胶,可开窗通风。


2、仪器设备:尽量集中放置,实验室内外的联系应保障畅通。


3、工作人员:合理安排人员,充分保障人员的休息,不能疲劳作业;对风险进行合理评估,减轻工作人员心理压力,必要时应由专业人员进行心理疏导。


4、实验室外的防护:注意更衣、就餐时同事之间的安全距离。






讲者:武汉市第四医院 曾吉;编辑:中国医科大学附属盛京医院大连医院 朱聪智



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本文完
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